Prosedur Kerja Standar Validasi Reagen

A. Persiapan Petugas

1. Ikatlah rambut dan lepas gelang/cincin yang dapat mengganggu pekerjaan di laboratorium.
2. Cuci tangan dan balut luka pada tangan (bila ada) serapat mungkin.
3. Pakailah jas lab dan sarung tangan
4. Pakailah sepatu tertutup
5. Siap untuk bekerja

B. Persiapan Alat

1. Centrifuge
2. Tabung reaksi ukuran 12 x 75 mm (disposable)
3. Pipet pasteur plastik
4. Labu semprot
5. Wadah limbah
6. Wadah untuk bilasan
7. Spidol tahan air

C. Persiapan Reagen

1. Tempatkan reagen dan suspensi sel pada cool box suhu 2-10⁰C
2. Lihat no lot reagen
3. Lihat tanggal kedaluarsa
4. Lihat secara visual kualitas reagen

D. Persiapan Lembar Kerja Pemeriksaan

1. Checklist dan lembar kerja validasi reagen

E. Langkah Pemeriksaan

Anti – A

1. Disiapkan tabung sebanyak 3 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, II, dan III
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 1 tetes test sel A 5 %
   • tabung II : 1 tetes test sel B 5 %
   • tabung III : 1 tetes test sel O 5 %
3. Diteteskan masing-masing tabung 2 tetes anti-A pada tabung I, II dan III
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Di sentrifuge 3000 rpm selama 15 detik
6. Di baca hasil reaksi.

Pembacaan Hasil

Dibaca reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I terjadi Aglutinasi (Positif)

– Pada tabung II tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung III tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

Anti – B

1. Siapkan tabung sebanyak 3 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, II, dan III.
2. Isi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 1 tetes test sel A 5 %
   • tabung II : 1 tetes test sel B 5 %
   • tabung III : 1 tetes test sel O 5 % 
3. Diteteskan masing-masing 2 tetes anti-B pada tabung I, II dan III
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Disentrifuge 3000 rpm selama 15 detik.
6. Di baca hasil reaksi.

Pembacaan Hasil

Dibaca hasil reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung II terjadi Aglutinasi (Positif)

– Pada tabung III tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

Anti – D (Rhesus)

1. Disiapkan tabung sebanyak 4 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, tabung II, tabung III, tabung IV,
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 1 tetes test sel A 5 % Rhesus Positif
   • tabung II : 1 tetes test sel B 5 % Rhesus Positif
   • tabung III : 1 tetes test sel A 5 % Rhesus Positif
   • tabung IV: 1 tetes test sel B 5 % Rhesus Positif
3. Diteteskan masing-masing 2 tetes anti-D pada tabung I dan II dan 2 tetes Bovine Albumin 22% pada tabung III dan IV
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Disentrifuge 3000 rpm selama 15 detik.
6. Di baca hasil reaksi.

Pembacaan Hasil

Dibaca hasil reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I dan II terjadi Aglutinasi (Positif)

– Pada tabung III dan IV tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

Test sel A standar

1. Disiapkan tabung sebanyak 2 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, dan tabung II.
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   •     – tabung I : 2 tetes Anti-A
   •     – tabung II : 2 tetes Anti-B
3. Diteteskan pada masing-masing 1 tetes test sel A Standar 5 % pada tabung I dan II.
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Disentrifuge 3000 rpm selama 15 detik.
6. Di Baca hasil reaksi

Pembacaan Hasil

Dibaca hasil reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I terjadi Aglutinasi (Positif)

– Pada tabung II tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

Test sel B standar

1. Disiapkan tabung sebanyak 2 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, dan tabung II
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 2 tetes Anti-A
   • tabung II : 2 tetes Anti-B
3. Diteteskan masing-masing 1 tetes test sel B Standar 5 % pada tabung I dan II
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Disentrifuge 3000 rpm selama 15 detik.
6. Dibaca hasil reaksi

Pembacaan Hasil

Dibaca hasil reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung II terjadi Aglutinasi (Positif)

Test sel O standar

1. Disiapkan tabung sebanyak 2 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, dan tabung II
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 2 tetes Anti-A
   • tabung II : 2 tetes Anti-B
3. Diteteskan masing-masing 1 tetes test sel O Standar 5 % pada tabung I dan II
4. Dikocok-kocok semua tabung hingga tercampur.
5. Diputar 3000 rpm selama 15 menit
6. Dibaca hasil reaksi

Pembacaan Hasil

Dibaca reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung II tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

Bovine Albumin 22%

1. Disiapkan tabung sebanyak 3 buah pada sebuah rak dan diberi label tabung I, II, dan III
2. Diisi masing-masing tabung dengan :
   • tabung I : 1 tetes test sel A 5 %
   • tabung II : 1 tetes test sel B 5 %
   • tabung III : 1 tetes test sel O 5 %
3. Diteteskan masing-masing 2 tetes Bovine Albumin 22 % pada tabung I, II dan III
4. Homogenisasi semua tabung hingga tercampur baik
5. Disentrifuge 3000 rpm selama 15 detik.
6. Dibaca reaksi, bila ketiga tabung negatif, lanjutkan Diinkubasi 37 ° C selama 15 detik
7. Disentrifugasi 3000 rpm selama 15 detik
8. Dibaca hasil reaksi

Pembacaan Hasil

Dibaca hasil reaksi dengan mengocok tabung perlahan-lahan

– Pada tabung I tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung II tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

– Pada tabung III tidak terjadi Aglutinasi (Negatif)

F. Pembacaan Hasil

1. Baca dan catat pemeriksaan pada lembar kerja validasi reagen
2. Hasil yang sudah dicatat dicek ulang oleh orang kedua
3. Lembar hasil yang sudah dibuat dicek ulang oleh orang kedua dan ditandatangani oleh penanggung jawab